Krav
PATENTKRAV1. Modifisert PH20-polypeptid som omfatter én eller flere aminosyreerstatninger i et umodifisert PH20-polypeptid, hvor:det umodifiserte PH20-polypeptidet består av aminosyresekvensen angitt i SEKV ID NR: 3, 7 eller 32-66;det modifiserte PH20-polypeptidet viser økt hyaluronidaseaktivitet som er minst 120% av hyaluronidaseaktiviteten sammenlignet med det ikke-modifiserte PH20-polypeptidet som ikke inneholder nevnte aminosyreerstatninger;hvor aminosyreerstatningen er i en stilling som tilsvarer en stilling valgt blant 1, 12, 15, 24, 26, 27, 29, 30, 31, 32, 33, 37, 39, 46, 48, 52, 58, 63 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 84, 86, 87, 92, 93, 94, 97, 118, 120, 127, 131, 135, 141, 142, 147, 148, 150, 151, 152, 155, 156, 163, 164, 165, 166, 169, 170, 174, 198, 206, 209, 212, 213, 215, 219, 233, 234, 236, 238, 247, 257 , 259, 260, 261, 263, 269, 271, 272, 276, 277, 278, 282, 291, 293, 305, 308, 309, 310, 313, 315, 317, 318, 320, 324, 325, 326 , 328, 347, 353, 359, 371, 377, 380, 389, 392, 395, 399, 405, 407, 409, 410, 418, 419, 421, 425, 431, 433, 436, 437, 438, 439 440, 441, 442, 443, 445, 446 og 447 med referanse til aminosyrestillinger angitt i SEKV ID NR: 3, hvor tilsvarende aminosyrestillinger identifiseres ved å sammenstille PH20-polypeptidet med polypeptidet som har aminosyresekvensen angitt i SEKV ID NR: 3, med den betingelse av at dersom det modifiserte PH20-polypeptidet bare inkluderer en enkelt aminosyreerstatning, da tilsvarer ikke erstatningen aminosyreerstatning N219A med referanse til aminosyrestillinger angitt i SEKV ID NR: 3; ogdet modifiserte PH20-polypeptidet omfatter opptil 10 aminosyreerstatninger sammenlignet med det umodifiserte PH20-polypeptidet som ikke inneholder nevnte erstatninger.2. Modifisert PH20-polypeptid ifølge krav 1, hvor aminosyreerstatningen er valgt blant:histidin (H) i en stilling som tilsvarer stilling 1; Q i en stilling som tilsvarer stilling 1; V i en stilling som tilsvarer stilling 15; E i en stilling som tilsvarer stilling 24; H i en stilling som tilsvarer stilling 24; K i en stilling som tilsvarer stilling 27; R i en stilling som tilsvarer stilling 27; E i en stilling som tilsvarer stilling 29; I i en stilling som tilsvarer stilling 29; L i en stilling som tilsvarer stilling 29; M i en stilling som tilsvarer stilling 29; P i en stilling som tilsvarer stilling 29; S i en stilling som tilsvarer stilling 29; V i en stilling som tilsvarer stilling 29; G i en stilling som tilsvarer stilling 30; H i en stilling som tilsvarer stilling 30; K i en stilling som tilsvarer stilling 30; M i en stilling som tilsvarer stilling 30; R i en stilling som tilsvarer stilling 30; S i en stilling som tilsvarer stilling 30; A i en stilling som tilsvarer stilling 31; C i en stilling som tilsvarer stilling 31; H i en stilling som tilsvarer stilling 31; I i en stilling som tilsvarer stilling 31; K i en stilling som tilsvarer stilling 31; L i en stilling som tilsvarer stilling 31; P i en stilling som tilsvarer stilling 31; R i en stilling som tilsvarer stilling 31; S i en stilling som tilsvarer stilling 31; T i en stilling som tilsvarer stilling 31; V i en stilling som tilsvarer stilling 31; F i en stilling som tilsvarer stilling 32; G i en stilling som tilsvarer stilling 32; H i en stilling som tilsvarer stilling 32; W i en stilling som tilsvarer stilling 33; F i en stilling som tilsvarer stilling 37; N i en stilling som tilsvarer stilling 39; T i en stilling som tilsvarer stilling 39; F i en stilling som tilsvarer stilling 48; H i en stilling som tilsvarer stilling 48; N i en stilling som tilsvarer stilling 48; W i en stilling som tilsvarer stilling 63; V i en stilling som tilsvarer stilling 67; A i en stilling som tilsvarer stilling 69; C i en stilling som tilsvarer stilling 69; F i en stilling som tilsvarer stilling 69; G i en stilling som tilsvarer stilling 69; I i en stilling tilsvarende stilling 69; L i en stilling som tilsvarer stilling 69; M i en stilling som tilsvarer stilling 69; P i en stilling som tilsvarer stilling 69; R i en stilling som tilsvarer stilling 69; W i en stilling som tilsvarer stilling 69; Y i en stilling som tilsvarer stilling 69; R i en stilling som tilsvarer stilling 71; S i en stilling som tilsvarer stilling 71; M i en stilling som tilsvarer stilling 72; Q i en stilling som tilsvarer stilling 72; H i en stilling tilsvarende stilling 73; L i en stilling som tilsvarer stilling 73; W i en stilling tilsvarende stilling 73; F i en stilling som tilsvarer stilling 75; L i en stilling som tilsvarer stilling 75; R i en stilling som tilsvarer stilling 75; T i en stilling som tilsvarer stilling 75; C i en stilling som tilsvarer stilling 87; T i en stilling som tilsvarer stilling 87; Y i en stilling som tilsvarer stilling 87; C i en stilling som tilsvarer stilling 92; I i en stilling tilsvarende stilling 93; L i en stilling som tilsvarer stilling 93; R i en stilling som tilsvarer stilling 93; T i en stilling som tilsvarer stilling 93; R i en stilling som tilsvarer stilling 94; Q i en stilling som tilsvarer stilling 118; F i en stilling som tilsvarer stilling 120; V i en stilling som tilsvarer stilling 120; Y i en stilling som tilsvarer stilling 120; D i en stilling som tilsvarer stilling 135; G i en stilling som tilsvarer stilling 135; R i en stilling som tilsvarer stilling 135; H i en stilling som tilsvarer stilling 141; Y i en stilling som tilsvarer stilling 141; R i en stilling som tilsvarer stilling 147; V i en stilling som tilsvarer stilling 147; K i en stilling som tilsvarer stilling 148; G i en stilling som tilsvarer stilling 150; K i en stilling som tilsvarer stilling 151; L i en stilling som tilsvarer stilling 151; M i en stilling som tilsvarer stilling 151; Q i en stilling som tilsvarer stilling 151; R i en stilling som tilsvarer stilling 151; R i en stilling som tilsvarer stilling 152; G i en stilling som tilsvarer stilling 155; K i en stilling som tilsvarer stilling 155; D i en stilling som tilsvarer stilling 156; A i en stilling som tilsvarer stilling 163; E i en stilling som tilsvarer stilling 163; K i en stilling som tilsvarer stilling 163; R i en stilling som tilsvarer stilling 163; M i en stilling som tilsvarer stilling 164; D i en stilling som tilsvarer stilling 165; N i en stilling som tilsvarer stilling 165; R i en stilling som tilsvarer stilling 170; D i en stilling som tilsvarer stilling 198; N i en stilling som tilsvarer stilling 212; M i en stilling som tilsvarer stilling 215; S i en stilling som tilsvarer stilling 219; K i en stilling som tilsvarer stilling 233; R i en stilling som tilsvarer stilling 233; R i en stilling som tilsvarer stilling 236; I i en stilling som tilsvarer stilling 247; T i en stilling som tilsvarer stilling 257; P i en stilling som tilsvarer stilling 259; Y i en stilling tilsvarende stilling 260; K i en stilling som tilsvarer stilling 263; R i en stilling som tilsvarer stilling 263; A i en stilling som tilsvarer stilling 269; L i en stilling som tilsvarer stilling 271; M i en stilling som tilsvarer stilling 271; T i en stilling som tilsvarer stilling 272; D i en stilling som tilsvarer stilling 276; S i en stilling som tilsvarer stilling 276; Y i en stilling som tilsvarer stilling 276; H i en stilling som tilsvarer stilling 278; K i en stilling som tilsvarer stilling 278; N i en stilling som tilsvarer stilling 278; R i en stilling som tilsvarer stilling 278; S i en stilling som tilsvarer stilling 278; T i en stilling som tilsvarer stilling 278; Y i en stilling som tilsvarer stilling 278; M i en stilling som tilsvarer stilling 282; A i en stilling som tilsvarer stilling 293; C i en stilling som tilsvarer stilling 293; F i en stilling som tilsvarer stilling 293; M i en stilling som tilsvarer stilling 293; P i en stilling som tilsvarer stilling 293; Q i en stilling som tilsvarer stilling 293; V i en stilling som tilsvarer stilling 293; E i en stilling som tilsvarer stilling 305; G i en stilling som tilsvarer stilling 308; N i en stilling som tilsvarer stilling 308; K i en stilling som tilsvarer stilling 313; R i en stilling som tilsvarer stilling 313; H i en stilling som tilsvarer stilling 320; K i en stilling som tilsvarer stilling 320; R i en stilling som tilsvarer stilling 320; R i en stilling som tilsvarer stilling 324; A i en stilling som tilsvarer stilling 325; D i en stilling som tilsvarer stilling 325; E i en stilling som tilsvarer stilling 325; G i en stilling som tilsvarer stilling 325; H i en stilling som tilsvarer stilling 325; K i en stilling som tilsvarer stilling 325; M i en stilling som tilsvarer stilling 325; N i en stilling som tilsvarer stilling 325; Q i en stilling som tilsvarer stilling 325; S i en stilling som tilsvarer stilling 325; V i en stilling som tilsvarer stilling 326; I i en stilling som tilsvarer stilling 328; K i en stilling som tilsvarer stilling 328; L i en stilling som tilsvarer stilling 328; S i en stilling som tilsvarer stilling 328; Y i en stilling som tilsvarer stilling 328; V i en stilling som tilsvarer stilling 353; T i en stilling som tilsvarer stilling 359; R i en stilling som tilsvarer stilling 371; P i en stilling som tilsvarer stilling 377; T i en stilling som tilsvarer stilling 377; W i en stilling som tilsvarer stilling 380; Y i en stilling som tilsvarer stilling 380; K i en stilling som tilsvarer stilling 389; M i en stilling som tilsvarer stilling 392; R i en stilling som tilsvarer stilling 395; G i en stilling som tilsvarer stilling 405; A i en stilling som tilsvarer stilling 409; Q i en stilling som tilsvarer stilling 409; T i en stilling som tilsvarer stilling 410; P i en stilling som tilsvarer stilling 418; K i en stilling som tilsvarer stilling 425; K i en stilling som tilsvarer stilling 436; I i en stilling som tilsvarer stilling 437; M i en stilling som tilsvarer stilling 437; T i en stilling som tilsvarer stilling 438; F i en stilling som tilsvarer stilling 441; R i en stilling som tilsvarer stilling 442; A i en stilling som tilsvarer stilling 446; D i en stilling som tilsvarer stilling 447; N i en stilling som tilsvarer stilling 447; og / eller med Q i en stilling som tilsvarer stilling 447, med referanse til aminosyrestillinger angitt i SEKV ID NR: 3.3. Modifisert PH20-polypeptid ifølge krav 1, hvor aminosyreerstatningen er valgt fra E i en stilling som tilsvarer stilling 12; E i en stilling som tilsvarer stilling 26; K i en stilling som tilsvarer stilling 26; R i en stilling som tilsvarer stilling 46; Q i en stilling som tilsvarer stilling 52; Q i en stilling som tilsvarer stilling 58; H i en stilling tilsvarende stilling 68; Q i en stilling som tilsvarer stilling 68; A i en stilling som tilsvarer stilling 70; C i en stilling som tilsvarer stilling 70; F i en stilling som tilsvarer stilling 70; G i en stilling som tilsvarer stilling 70; H i en stilling som tilsvarer stilling 70; K i en stilling som tilsvarer stilling 70; L i en stilling som tilsvarer stilling 70; N i en stilling som tilsvarer stilling 70; P i en stilling som tilsvarer stilling 70; R i en stilling som tilsvarer stilling 70; S i en stilling som tilsvarer stilling 70; T i en stilling som tilsvarer stilling 70; A i en stilling som tilsvarer stilling 74; C i en stilling som tilsvarer stilling 74; G i en stilling som tilsvarer stilling 74; N i en stilling som tilsvarer stilling 74; P i en stilling som tilsvarer stilling 74; R i en stilling som tilsvarer stilling 74; S i en stilling som tilsvarer stilling 74; V i en stilling som tilsvarer stilling 74; W i en stilling som tilsvarer stilling 74; G i en stilling som tilsvarer stilling 84; R i en stilling som tilsvarer stilling 84; G i en stilling som tilsvarer stilling 97; H i en stilling som tilsvarer stilling 127; N i en stilling som tilsvarer stilling 127; G i en stilling som tilsvarer stilling 131; V i en stilling som tilsvarer stilling 131; R i en stilling som tilsvarer stilling 142; A i en stilling som tilsvarer stilling 166; F i en stilling som tilsvarer stilling 166; H i en stilling som tilsvarer stilling 166; L i en stilling som tilsvarer stilling 166; R i en stilling som tilsvarer stilling 166; Y i en stilling som tilsvarer stilling 166; K i en stilling som tilsvarer stilling 174; K i en stilling som tilsvarer stilling 206; M i en stilling som tilsvarer stilling 213; N i en stilling som tilsvarer stilling 213; S i en stilling som tilsvarer stilling 238; N i en stilling som tilsvarer stilling 261; R i en stilling som tilsvarer stilling 277; T i en stilling som tilsvarer stilling 277; L i en stilling som tilsvarer stilling 309; N i en stilling som tilsvarer stilling 309; Q i en stilling som tilsvarer stilling 309; R i en stilling som tilsvarer stilling 309; T i en stilling som tilsvarer stilling 309; A i en stilling som tilsvarer stilling 310; G i en stilling som tilsvarer stilling 310; H i en stilling som tilsvarer stilling 315; I i en stilling som tilsvarer stilling 317; K i en stilling som tilsvarer stilling 317; R i en stilling som tilsvarer stilling 317; M i en stilling som tilsvarer stilling 318; G i en stilling som tilsvarer stilling 347; S i en stilling som tilsvarer stilling 347; M i en stilling som tilsvarer stilling 399; T i en stilling som tilsvarer stilling 399; W i en stilling som tilsvarer stilling 399; D i en stilling som tilsvarer stilling 407; Q i en stilling som tilsvarer stilling 407; F i en stilling som tilsvarer stilling 419; I i en stilling som tilsvarer stilling 419; R i en stilling som tilsvarer stilling 419; S i en stilling som tilsvarer stilling 419; K i en stilling som tilsvarer stilling 421; N i en stilling som tilsvarer stilling 421; Q i en stilling som tilsvarer stilling 421; R i en stilling som tilsvarer stilling 421; S i en stilling som tilsvarer stilling 421; A i en stilling som tilsvarer stilling 431; H i en stilling som tilsvarer stilling 431; K i en stilling som tilsvarer stilling 431; Q i en stilling som tilsvarer stilling 431; R i en stilling som tilsvarer stilling 431; S i en stilling som tilsvarer stilling 431; V i en stilling som tilsvarer stilling 431; L i en stilling som tilsvarer stilling 433; R i en stilling som tilsvarer stilling 433; V i en stilling som tilsvarer stilling 439; H i en stilling som tilsvarer stilling 440; R i en stilling som tilsvarer stilling 440; A i en stilling som tilsvarer stilling 443; M i en stilling som tilsvarer stilling 443; M i en stilling som tilsvarer stilling 445; og / eller med P i en stilling som tilsvarer stilling 445, med referanse til aminosyrestillinger angitt i SEKV ID NR: 3.4. Modifisert PH20-polypeptid ifølge krav 1, som omfatter en sekvens av aminosyrer som angitt i hvilken som helst av SEKV ID NR: 73, 78, 91, 95, 96, 105, 106, 108, 109, 111, 112, 113, 115, 117 , 118, 119, 120, 123-126, 128-136, 139-141, 149, 154, 155, 164, 165, 167, 191, 192, 196, 197, 199-205, 207, 208, 225, 226 , 228, 229, 231, 233, 237, 253, 254, 256, 257, 277, 283, 293, 295, 296, 298, 300, 303, 316, 318, 321, 322, 338-340, 344, 348 , 367, 369, 371, 377, 384-388, 394, 398, 399, 401, 406-408, 410, 412, 414, 416, 431, 448, 459, 465, 469, 478, 479, 482, 493 , 497, 501, 503, 507, 508, 510-512, 514, 518, 522, 523, 537-543, 545, 558, 559, 561, 563-566, 569, 572, 574, 594, 596, 618 -620, 624-634, 637, 640-644, 652, 657, 675, 695, 698, 699, 700, 712, 717, 725, 738, 748-750, 757, 775, 799-801, 807, 822 , 825, 844, 847, 851 og 853, eller en sekvens av aminosyrer som utviser minst 96% sekvensidentitet med en sekvens av aminosyrer angitt i en hvilken som helst av SEKV ID NR: 73, 78, 91, 95, 96, 105, 106, 108, 109, 111, 112, 113 , 115, 117, 118, 119, 120, 123-126, 128-136, 139-141, 149, 154, 155, 164, 165, 167, 191, 192, 196, 197, 199-205, 207, 208 , 225, 226, 228, 229, 231, 233, 237, 253, 254, 256, 257, 277, 283, 293, 295, 296, 298, 300, 303, 316, 318, 321, 322, 338-340 , 344, 348, 367, 369, 371, 377, 384-388, 394, 398, 399, 401, 406-408, 410, 412, 414, 416, 431, 448, 459, 465, 469, 478, 479 , 482, 493, 497, 501, 503, 507, 508, 510-512, 514, 518, 522, 523, 537-543, 545, 558, 559, 561, 563-566, 569, 572, 574, 594 , 596, 618-620, 624-634, 637, 640-644, 652, 657, 675, 695, 698, 699, 700, 712, 717, 725, 738, 748-750, 757, 775, 799-801 , 807, 822, 825, 844, 847, 851 og 853 og som inneholder aminosyreerstatningen sammenlignet med tilsvarende stillinger i et polypeptid av en hvilket som helst av SEKV ID NR: 3, 7 og 32-66.5. Modifisert PH20-polypeptid ifølge krav 3, som omfatter en sekvens av aminosyrer som angitt i hvilken som helst av SEKV ID NR: 86, 89, 99, 100, 159, 173, 181, 193, 195, 209-220, 238, 239, 242 , 247-252, 267, 269, 277, 308, 324, 325, 330, 335, 355, 419, 421-423, 425, 428, 435, 455, 456, 462, 463, 484, 490, 506, 531 , 533, 579, 581-583, 585, 587, 588, 602, 605, 606, 609, 613, 648, 731, 732, 734, 742, 746, 760, 762, 764, 765, 769-773, 779 , 782, 783, 786-789, 794, 795, 814, 816, 819, 826, 830, 836 og 838, eller en sekvens av aminosyrer som utviser minst 96% sekvensidentitet med en sekvens av aminosyrer som angitt i hvilken som helst av 86, 89, 99, 100, 159, 173, 181, 193, 195, 209-220, 238, 239, 242, 247-252, 267, 269, 277, 308, 324, 325, 330, 335, 355, 419, 421-423, 425, 428, 435, 455, 456, 462, 463, 484, 490, 506, 531, 533, 579, 581-583, 585, 587, 588, 602, 605, 606, 609, 613, 648, 731, 732, 734, 742, 746, 760, 762, 764, 765, 769-773, 779, 782, 783, 786-789, 794, 795, 814, 816, 819, 826, 830, 836 og 838 og som inneholder aminosyreerstatningen sammenlignet med tilsvarende stillinger i et polypeptid med hvilket som helst av SEKV ID NR: 3, 7 og 32-66.6. Modifisert PH20-polypeptid ifølge et hvilket som helst av kravene 1-5 som viser minst 2,0 ganger hyaluronidaseaktiviteten sammenlignet med PH20-polypeptidet som ikke inneholder aminosyreerstatningen.7. Modifisert PH20-polypeptid ifølge et hvilket som helst av kravene 1-6 som omfatter én eller flere av en modifikasjon valgt blant glykosylering, sialering, albuminering, farnesylering, karboksylering, hydroksylering og fosforylering.8. Modifisert PH20-polypeptid ifølge et hvilket som helst av kravene 1-7 som omfatter minst én N-acetylglukosaminenhet bundet til hver av minst tre asparagin (N) rester.9. Modifisert PH20-polypeptid ifølge krav 8, hvor de tre asparaginrester tilsvarer aminosyrerestene 200, 333 og 358 i SEKV ID NR: 3.10. Modifisert PH20-polypeptid ifølge et hvilket som helst av kravene 1-9 som er konjugert til en polymer.11. Modifisert PH20-polypeptid ifølge krav 10, hvor polymeren er dekstran eller PEG.12. Nukleinsyremolekyl som koder for et modifisert PH20-polypeptid ifølge hvilket som helst av kravene 1-11.13. Vektor som omfatter nukleinsyremolekylet ifølge krav 12.14. Isolert celle som omfatter vektoren ifølge krav 13.15. Fremgangsmåte for fremstilling av et modifisert PH20-polypeptid som omfatter: innføring av nukleinsyremolekylet ifølge krav 12 i en celle som er i stand til å inkorporere N-bundne sukkerenheter i polypeptidet;dyrking av cellen under betingelser der et kodet modifisert PH20-polypeptid fremstilles og utskilles fra cellen; ogutvinning av det uttrykte polypeptid.16. Farmasøytisk sammensetning, som omfatter et modifisert PH20-polypeptid ifølge hvilket som helst av kravene 1-11.17. Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 16 for anvendelse for behandling av en sykdom eller lidelse valgt fra en som involverer akkumulering av glykosaminoglykan i hjernen; en kardiovaskulær lidelse; en oftalmisk lidelse; og lungesykdom.18. Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 16 for anvendelse for behandling av en tumor. 19. Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 16 for avlevering av et terapeutisk middel for anvendelse i behandling av en tumor; for anvendelse i behandling av glykosaminoglykanakkumulering i hjernen; for anvendelse i behandling av en hjerteog karsykdom; for anvendelse i behandling av en oftalmisk lidelse; eller for anvendelse i behandling av lungesykdom.20. Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 16 for å øke penetrering av terapeutiske midler inn i faste svulster eller for å øke biotilgjengeligheten av terapeutiske midler for anvendelse i behandling av en tumor; for anvendelse i behandling av glykosaminoglykanakkumulering i hjernen; for anvendelse i behandling av en hjerte- og karsykdom; for anvendelse i behandling av en oftalmisk lidelse; eller for anvendelse i behandling av lungesykdom.21. Modifisert polypeptid ifølge krav 11 for anvendelse for behandling av en tumor, hvor det modifiserte PH20-polypeptidet er konjugert til PEG.
